Клубеньковые образования у небобовых растений. Для чего у бобовых на корнях клубеньки? Корневые клубеньки
Корневые клубеньки или образования, напоминающие клубеньки, широко распространены на корнях не только бобовых растений. Они обнаружены у голосеменных и покрытосеменных двудольных растений.
Имеется до 200 видов различных растений, связывающих азот в симбиозе с микроорганизмами, образующими клубеньки на их корнях (или листьях).
Рис. 168. Клубеньковая ткань ольхи (по Дж. Бекингу).
Клубеньки голосеменных растений (порядки Cycadales - саговники, Ginkgoales - гинкго-вые, Coniferales - хвойные) имеют ветвящуюся коралловидную, сферическую или четковидную форму. Они представляют собой утолщенные, видоизмененные боковые корни. Природа возбудителя, вызывающего их образование, до сих пор не выяснена. Эндофиты голосеменных растений относят и к грибам (фикомицетам), и к актиномицетам, и к бактериям, и к водорослям. Некоторые исследователи предполагают существование множественного симбиоза. Например, считают, что у саговников в симбиозе принимают участие азотобактер, клубеньковые бактерии и водоросли. Также не решен вопрос и о функции клубеньков у голосеменных. Ряд ученых пытается в первую очередь обосновать роль клубеньков как азотфиксаторов. Некоторые исследователи рассматривают клубеньки подокарповых как резервуары воды, а клубенькам саговников нередко приписывают функции воздушных корней.
Рис. 169. Клубеньки на корнях трибулюс (по Е. и О. Аллен).
У ряда представителей покрытосеменных двудольных растений клубеньки на корнях были обнаружены свыше 100 лет назад.
Сначала остановимся на характеристике клубеньков деревьев, кустарников и полукустарников (семейства Coriariaceae, Myricaceae, Be-tulaceae, Casuarinaceae, Elaeagnaceae, Rham-naceae), входящих в эту группу. Клубеньки большинства представителей данной группы - коралловидные гроздья розово-красного цвета, с возрастом приобретающие коричневую окраску. Имеются данные о наличии в них гемоглобина. У видов рода Elaeagnus (лоховые) клубеньки белого цвета.
Рис. 170. Клубеньки на корнях вейштка лесного (по И.Л. Клевенской).
Нередко клубеньки имеют большие размеры. У казуарин (Casuarina) они достигают в длину 15 см. Функционируют несколько лет.
Растения с клубеньками распространены в разных климатических поясах или приурочены к определенному ареалу. Так, Shepherdia и Ceanothus встречаются только в Северной Америке, Casuarina - преимущественно в Австралии. Значительно шире распространены лоховые и облепиха.
Многие растения рассматриваемой группы произрастают на бедных питательными элементами почвах - песках, дюнах, скальных породах, болотах.
Подробнее всего изучены клубеньки ольхи (Alnus), в частности A. glutinosa, обнаруженные еще в 70-х годах прошлого столетия М. С. Ворониным (рис. 167). Существует предположение, что клубеньки свойственны не только современным, но и вымершим видам ольхи, поскольку их находили на корнях ископаемой ольхи в третичных отложениях долины реки Алдана - в Якутии.
Рис. 171. Схема строения клубенька вейника лесного: 1 - кора, 2 - коровая паренхима; з - перициклическая паренхима; 4 - сосудистый пучок; 5 - эндодерма; 6 - бактерии (по И. Л. Клевенской).
Эндофит в клубеньках полиморфен. Он обычно встречается в виде гиф, везикул и бактероидов (рис. 168). Таксономическое положение эндофита до сих пор не установлено, поскольку многочисленные попытки выделить его в чистую культуру оказывались бесплодными, а если и удавалось выделить культуры, они оказывались невирулентными.
Основное значение всей этой группы растений, по-видимому, заключается в способности фиксировать молекулярный азот в симбиозе с эндофитом. Произрастая в областях, где разведение сельскохозяйственных растений с точки зрения экономики нерационально, они играют роль пионеров в освоении земли. Так, ежегодная прибавка азота в почве дюн Ирландии (мыс Верде) под посадками Casuarina equi-setifolia достигает 140 кг/га. Содержание азота в почве под ольхой на 30-50% выше, чем под березой, сосной, ивой. В высушенных листьях ольхи азота вдвое больше, чем в листьях других древесных растений. По расчетам А. Виртанена (1962), роща ольхи (в среднем 5 растений на 1 м 2) дает за 7 лет прибавку азота 700 кг/га.
Значительно реже клубеньки встречаются у представителей семейства Zygophyllaceae (парнолистниковые). Впервые они были обнаружены Б. Л. Исаченко (1913) на корневой системе Tribulus terrestris. Позднее клубеньки были найдены и у других видов якор-цев.
Большинство представителей семейства Zygophyllaceae - ксерофитные кустарники или многолетние травы. Они распространены в пустынях тропических и субтропических областей, растут и на песчаных дюнах, пустошах и болотах умеренного пояса.
Интересно отметить, что такие тропические растения, как парнолистник ярко-красный, образуют клубеньки только при высокой температуре и низкой влажности почвы. Увлажнение почвы до 80% от полной влагоемкости препятствует формированию клубеньков. Как известно, у бобовых растений умеренного климата наблюдается обратное явление. При недостаточной влажности они не образуют клубеньков.
Клубеньки у растений семейства парнолист-никовых различаются размерами и расположением на корневой системе. Крупные клубеньки обычно развиваются на главном корне и близко от поверхности почвы. Более мелкие находятся на боковых корнях и на большей глубине. Иногда клубеньки образуются на стеблях, если они лежат на поверхности почвы.
Клубеньки у якорцев наземных на песках вдоль Южного Буга имеют вид мелких белых слегка заостренных или круглых бородавок.
Они обычно покрыты сплетением грибных гиф, проникающих внутрь коры корня.
У парнолистника ярко-красного клубеньки представляют собой концевые утолщения боковых корней растений. В клубеньках обнаруживаются бактероиды; бактерии очень напоминают клубеньковые.
Клубеньки тропических растений Tribulus cistoides твердые, округлые, около 1 мм в диаметре, соединены с корнями широким основанием, на старых корнях нередко мутовчатые. Чаще располагаются на корнях, чередуясь, с одной или с двух сторон (рис. 169). Для клубеньков характерно отсутствие зоны меристемы. Подобное явление отмечается при образовании клубеньков у хвойных растений. Клубенек поэтому возникает за счет деления клеток перицикла стелы.
Гистологическое изучение клубеньков Tribulus cistoides на разных стадиях развития показало, что в них отсутствуют микроорганизмы. На основании этого, а также скопления в клубеньках больших количеств крахмала их считают образованиями, выполняющими функцию обеспечения растений запасными питательными веществами.
Клубеньки вейника лесного - сферические или несколько удлиненные образования до 4 мм в диаметре, плотно сидящие на корнях растений (рис. 170). Цвет молодых клубеньков чаще всего белый, изредка розоватый, старых -желтый и бурый. Клубенек связан с центральным цилиндром корпя широким сосудистым пучком. Так же как и у Tribulus cistoides, клубеньки вейника имеют кору, коровую паренхиму, эндодерму, перициклическую паренхиму и сосудистый пучок (рис. 171).
Бактерии в клубеньках вейника лесного очень напоминают клубеньковых бактерий бобовых растений.
Клубеньки найдены на корнях капусты и редьки - представителей семейства крестоцветных. Предполагается, что их образуют бактерии, которые обладают способностью связывать молекулярный азот.
Среди растений семейства мареновых клубеньки встречаются у кофейных Coffea robusta и Goffea klainii. Они дихотомически ветвятся, иногда уплощены и имеют вид опахала. В тканях клубенька встречаются бактерии и бакте-роидные клетки. Бактерии, по мнению Стейар-та (1932), относятся к Rhizobium, но названы им Bacillus coffeicola.
Клубеньки у растений семейства розанных были обнаружены на дриаде (куропаточьей траве). У двух других представителей этого семейства - Purshia tridentata и Cercocarpus betuloides - описаны типичные коралловидные клубеньки. Однако никаких данных о строении этих клубеньков и природе их возбудителя в литературе пет.
Из семейства вересковых можно упомянуть только одно растение - медвежье ушко (или толокнянка), имеющее клубеньки на корневой системе. Многие авторы считают, что это коралловидные эктотрофные микоризы.
У покрытосеменных однодольных растений клубеньки распространены среди представителей семейства злаковых: лисохвоста лугового, мятлика лугового, волоснеца сибирского и волоснеца солончакового. Клубеньки образуются на концах корней; бывают продолговатыми, округлыми, веретеновидными. У лисохвоста молодые клубеньки светлые, прозрачные или полупрозрачные, с возрастом приобретают бурую или черную окраску. Данные о наличии бактерий в клетках клубеньков разноречивы.
Листовые клубеньки. Известно свыше 400 видов различных растений, образующих клубеньки на листьях. Наиболее хорошо изучены клубеньки у Pavetta и Psychotria. Они располагаются на нижней поверхности листьев вдоль основной жилки или рассеяны между боковыми жилками, имеют интенсивный зеленый цвет. В клубеньках сконцентрированы хлоропласты и танин. При старении на клубеньках часто появляются трещины.
Сформировавшийся клубенек заполнен бактериями, инфицирующими листья растения, очевидно, в момент прорастания семян. При выращивании стерильных семян клубеньки не возникают и растения развиваются хлоро-тичными. Выделенные из листовых клубеньков Psychotria bacteriophyla бактерии оказались принадлежащими к роду Klebsiella (К. rubiacearum). Бактерии фиксируют азот не только в симбиозе, но и в чистой культуре - до 25 мг азота на 1 г использованного сахара. Надо полагать, что они играют немаловажную роль в азотном питании растений на малоплодородных почвах. Есть основания полагать, что они снабжают растения не только азотом, но и биологически активными веществами.
Иногда на поверхности листьев можно увидеть глянцевые пленки или разноцветные пятна. Их образуют микроорганизмы филлосферы - особая разновидность эпифитных микроорганизмов, которые также участвуют в азотном питании растений. Бактерии филлосферы преимущественно олигонитрофилы (живут за счет ничтожных примесей азотсодержащих соединений в среде и, как правило, фиксируют небольшие количества молекулярного азота), тесно контактирующие с растением.
Свободноживущие азотфиксирующие микроорганизма. Азотобактер (AZOTOBACTER)
В 1901 году Бейеринк выделил из почвы аэробную неспорообразующую грамотрица-тельную бактерию, фиксирующую молекулярный азот, и назвал ее Azotobacter chroococcum (в родовом названии отражена способность бактерии фиксировать азот, в видовом - способность синтезировать коричневый пигмент - chroo и образовывать кокковидные клетки -coccum). Азотобактер - типичный представитель свободноживущих микроорганизмов. Свободноживущие - это все те микроорганизмы, которые живут в почве независимо от того, развивается вблизи растение или нет.
Рис. 173. Делящиеся клетки азотобактера (A. agilis), видны перитрихиалыше жгутики (7), у A. macrocyto-genes видны полярные жгутики (?) (по А. Бейлю и др.)-
Культуры азотобактера в лабораторных условиях отличаются полиморфизмом. Клетки разных видов азотобактера в молодом возрасте показаны на рисунке 172. Молодые клетки азотобактера подвижны; они имеют многочисленные или единичные жгутики (рис. 173). У азотобактера обнаружены выросты, подобные фимбриям (рис. 174). В старых культурах клетки азотобактера покрываются плотной оболочкой, образуя цисты. Они могут прорастать, давая начало молодым клеткам (рис. 175).
Полиморфизм азотобактера зависит в значительной степени от состава среды, на которой он выращивается. На среде с этиловым спиртом (в качестве единственного источника углерода) азотобактер длительное время сохраняет подвижность и форму палочек. В то же время на многих других средах полиморфизм проявляется очень резко.
Рис. 174. Фимбрпоподобные образования у клеток азотобактера. Увел. X 24 000. (По Э. В. Болтянской.)
На плотных питательных средах, не содержащих азота, азотобактер образует крупные слизистые, иногда морщинистые колонии (рис. 176), окрашивающиеся при старении в желтовато-зеленоватый, розовый или коричнево-черный цвет. Колониям разных видов азотобактера присуща своя специфическая пигментация.
К настоящему времени известен ряд видов азотобактера: Azotobacter chroococcum, Az. beijerinckii, Az. vinelandii, Az. agilis, Az. nigricans, Az. galophilum.
Рис. 175. Цисты азотобактера (по И. Чану и др.). Зрелая циста, наполненная гранулами жира и окруженная толстой плотной оболочкой (справа), и прорастающая циста (растущая молодая клетка разрывает оболочку цисты - слева). Увел. X 35 000.
Источником азота для азотобактера могут служить разнообразные минеральные (соли аммония, азотной и азотистой кислот) и органические (мочевина, различные аминокислоты) соединения. Однако если азотобактер развивается только за счет связанного в среде азота, он не выполняет своей основной функции - фиксации молекулярного азота. Азотобактер обычно фиксирует до 10-15 мг молекулярного азота на 1 г использованного источника углерода (например, глюкозы, сахарозы). Эта величина сильно колеблется в зависимости от условий выращивания культуры, состава питательной среды, ее кислотности, температуры, аэрации.
По отношению к источникам углерода В. Л. Омелянский (1923) назвал азотобактер полифагом («всеядным»).
Рис. 176. Развитие колоний A. chroococcum вокруг комочков почвы па безазотной среде.
Азотобактер хорошо усваивает разнообразные углеводы (моно- и дисахара, некоторые полисахариды), органические кислоты, многоатомные спирты (глицерин, маннит) и другие вещества.
Многим исследователям удавалось выращивать азотобактер в чашках с питательной средой без азота и углерода, если чашки были помещены в камеру, где находились пары ацетона, этилового спирта или некоторых других органических соединений. В присутствии легкодоступных форм углеродсодержащих соединений азотобактер может частично использовать углекислоту из атмосферы. Повышение концентрации углекислого газа до 0,5% в воздухе несколько стимулирует развитие азотобактера. Но азотобактером лучше усваиваются легкодоступные формы углеродсодержащих органических соединений. В почве запас подвижного органического вещества невелик, поэтому именно недостаток легкодоступных соединений углерода в первую очередь ограничивает развитие азотобактера в природных условиях.
Рис. 177. Колонии бейеринкии разных типов (гладкие и складчатые варианты): 1-4, 6-8, 10 - по Н. И. Гогорикидзе; 5, 9, 11 - по Дж. Бекингу.
Какие же органические соединения может использовать в почве азотобактер? Перегнойные вещества почвы азотобактером практически не усваиваются. Поэтому в почвах, даже очень богатых перегноем, при отсутствии свежих органических остатков интенсивного размножения азотобактера не происходит.
Однако, если в почве имеются органические соединения и продукты распада растительных и животных клеток, азотобактер развивается хорошо. В частности, он усиленно размножается в почвах, удобренных соломой и соломистым навозом, а также в разнообразных компостах, содержащих целлюлозу. Азотобактер хорошо ассимилирует вещества, образующиеся при распаде целлюлозы.
Развитие азотобактера и фиксация им азота в значительной степени зависят от наличия в среде фосфора. Источником фосфора могут служить как органические, так и минеральные фосфорсодержащие соединения. Высокая чувствительность азотобактера к фосфору позволила разработать микробиологический метод определения потребности почв в фосфорных удобрениях.
В качестве тест-организма в этом методе используется азотобактер. Микробиологические методы определения потребности почвы в удобрении имеют ряд преимуществ перед химическими анализами, хотя, безусловно, уступают в точности.
Важную роль в обмене веществ азотобактера играет кальций. Этот элемент необходим азотобактеру при питании как молекулярным, так и аммонийным азотом (Г. Н. Зайцева, 1965). Недостаток кальция в среде приводит к сильной вакуолизации клеток и их вздутию.
Высокая чувствительность азотобактера к кальцию, так же как и к фосфору, используется для определения потребности почв в известковании.
Микроэлементы (молибден, бор, ванадий, железо, марганец) необходимы азотобактеру в первую очередь для осуществления процесса азотфиксации. Потребность в микроэлементах определяется в значительной степени геохимическими условиями существования азотобактера в почвах. Штаммы микроорганизма, выделенные из почв с высоким естественным содержанием того или иного микроэлемента, нуждаются, как правило, в более высоких концентрациях этих элементов.
Интересно, что радиоактивные элементы (радий, торий, уран) оказывают стимулирующий эффект на развитие азотобактера и процесс азотфиксации.
Азотобактер чрезвычайно чувствителен к реакции среды. Оптимальная для его развития область рН 7,2-8.2. Однако азотобактер способен развиваться и на средах с рН от 4,5 до 9,0; кислая реакция среды неблагоприятно действует на его развитие. Из кислых почв выделяются неактивные формы азотобактера, утратившие способность связывать молекулярный азот.
Большое влияние на развитие азотобактера оказывает влажность почвы. Клетки азотобактера имеют меньшее осмотическое давление, чем клетки грибов и актиномицетов; потребность во влаге аналогична потребности высших растений. Азотобактер распространен в пресных водоемах, илах, затопляемых рисовых полях, сточных водах, сильно увлажненных почвах, на водных растениях в прудах и водохранилищах. Это свидетельствует о его высокой степени гидрофильности. На основании высокой потребности во влаге почвенных форм азотобактера предполагается, что предки некоторых морских и почвенных видов азотобактера могли быть общими.
В отношении температуры азотобактер является типичным мезофильным организмом, с оптимумом развития около 25-30 °С. Понижение температуры азотобактер переносит хорошо, поэтому зимой даже в северных широтах численность его клеток в почве заметно не уменьшается.
Из биологических факторов, влияющих на развитие азотобактера, следует прежде всего отметить почвенные микроорганизмы. Они могут оказывать влияние на жизнедеятельность азотобактера в почве косвенно, изменяя, например, рН или окислительно-восстановительные условия, и непосредственно, вырабатывая питательные и биологически активные вещества. Так, активирующее влияние целлюлозоразру-шающих и маслянокислых микроорганизмов на развитие азотобактера и его антагонистические отношения с представителями почвенной микрофлоры отмечали многие советские и зарубежные исследователи. Биоценоз микроорганизмов, формирующийся в условиях той или иной почвы, меняется в значительной степени под влиянием растительного покрова. И азотобактер как член биоценоза также зависит от этого фактора. С помощью метода радиоавтографии установлено, что при нанесении меченных по фосфору клеток азотобактера на семена зерновых культур клетки обычно концентрируются вокруг растущей корневой системы проростков.
Имеются, однако, данные, что клеток азотобактера в ризосфере растений очень мало. В самом лучшем случае (при полном отсутствии антагонистов и благоприятных окружающих условиях) их количество не превышает 1 % от общего числа ризосферной микрофлоры.
Культуры азотобактера, как правило, образуют значительное количество биологически активных веществ: витамины группы В, никотиновую и пантотеновую кислоты, биотин, гетероауксин и гиббереллин. Однако, несмотря на то что культуры азотобактера вырабатывают целую серию биологически активных веществ, внесение витаминов, гиббереллина и гетероауксина в среду ускоряет рост азотобактера. Реакция на дополнительное внесение витаминов в среду является индивидуальной особенностью штаммов.
Азотобактер может продуцировать ростовые вещества типа ауксинов. Это подтверждается опытами, в которых было установлено образование дополнительных корешков у черенков фасоли под влиянием ауксинов, вырабатываемых азотобактером. Биологический тест - карликовая форма гороха сорта Пионер - позволяет определить в культуре азотобактера гиббереллиноподобные соединения.
Все эти соединения в совокупности способны стимулировать прорастание семян растений и ускорять их рост в тех, конечно, случаях, когда на корневой системе растений находится достаточное количество клеток азотобактера.
Кроме того, была обнаружена антагонистическая активность азотобактера по отношению к возбудителям бактериальных болезней растений. Азотобактер синтезирует фунгистати-ческий (задерживающий развитие грибов) антибиотик группы анисомицина. Ряд грибных организмов, встречающихся на семенах и в почве (виды из родов Fusarium, Alternaria, Penicillium), может угнетать развитие многих видов растений, особенно в холодную погоду. Азотобактер, продуцируя противогрибные антибиотические вещества, помогает растениям ра и развиваться, что имеет особенно болы значение в ранние фазы развития.
К сожалению, способность азотобактера тивно размножаться в почве и проявлять с: многогранные качества весьма ограничена за дефицита легкодоступных органических ществ в почве и высокой требовательности мироорганизма к окружающим условиям. Поэте стимулирующий эффект азотобактера проявляется лишь на плодородных почвах.
Распространение азотобактера в почвах Советского Союза имеет определенные закономерности. В целинных подзолах и дерново-подзолистых почвах, характеризующихся кислой реакцией, условия для развития азотобактера неблагоприятны. Только окультуривание таких почв создает возможности для его развития. В почвах с повышенным увлажнением и преобладанием луговой растительности (почвы пойм) азотобактер обычно встречается в течение всего вегетационного периода в больших количествах. В торфяниках азотобактер или отсутствует, или развивается очень слабо. В зоне достаточно увлажненных северных мощных черноземов азотобактер развивается хорошо, а в зоне обычных и южных черноземов при отсутствии орошения, а также в целинных и неполивных окультуренных каштановых почвах только как весенний эфемер. Максимальное развитие азотобактера в весенний период наблюдается и в целинных и в богарных почвах сероземной зоны. В солонцах и солончаках распространены преимущественно солестойкие расы азотобактера. В основном в почвах нашей страны доминирует Az. chroococcum.
Бейеринкия (BEIJERINCKIA)
Впервые аэробные бактерии рода Beijerinckia были выделены из кислых почв рисовых полей в Индии (в 1939 г.). Г. Деркс (1950), обнаружив эту бактерию в почве Ботанического сада в Богоре (Ява), предложил назвать ее именем М. Бейеринка - одного из первых исследователей фиксаторов азота.
Клетки бактерий рода Beijerinckia имеют круглую, овальную или палочковидную формы; палочки иногда искривлены. Размеры молодых клеток 0,5-2,0 X 1,0-4,5 мкм. Встречаются подвижные и неподвижные формы. Цист и спор не образуют. Культуры характеризуются медленным ростом. Типичные колонии формируются обычно через 3 недели при 30 °С. Большинство культур Beijerinckia образует на безазотном агаре с глюкозой выпуклые, нередко складчатые, блестящие слизистые колонии очень вязкой консистенции (рис. 177). При старении культуры, как правило, образуют темноокрашенный пигмент.
На 1 г использованного энергетического материала организмы рода Beijerinckia фиксируют 16-20 мг молекулярного азота. Спектр углеродсодержащих соединений, доступных бейеринкии, значительно уже, чем у азотобактера. Хорошо используются моно- и дисаха-риды, хуже - крахмал, органические кислоты, ароматические вещества не усваиваются. Минеральный азот и многие аминокислоты бактерии рода Beijerinckia предпочитают молекулярному азоту.
Основные отличия бейеринкии от азотобактера- высокая кислотоустойчивость(могут расти даже при рН 3,0), кальцефобность (ничтожные дозы кальция подавляют рост), устойчивость к высоким концентрациям железа, алюминия.
Бактерии рода Beijerinckia широко распространены в почвах южной и тропической зоны, реже встречаются в зоне умеренного климата. Beijerinckia часто встречается на поверхности листьев тропических растений в Индонезии.
Раньше полагали, что бактерии рода Beijerinckia могут существовать только в кислых почвах. Сейчас установлено, что они неплохо развиваются и в нейтральных и щелочных почвах. Тем не менее следует полагать, что Beijerinckia играют значительную роль в азотном балансе главным образом кислых почв (латеритах, красноземах), не имея существенного агрономического значения для нейтральных почв.
Клостридиум (CLOSTRIDIUM)
Первый анаэробный микроорганизм, усваивающий молекулярный азот, был выделен и описан С. Н. Виноградским в 1893 г. Он оказался спорообразующей бактерией, которой было дано наименование Clostridium pasteurianum (родовое название происходит от латинского слова clostrum - веретено; видовое - pasteurianum - дано в честь Луи Пастера).
Клетки Cl. pasteurianum крупные, их длина 2,5-7,5 мкм, ширина 0,7 -1,3 мкм. Располагаются они поодиночке, парами или образуют короткие цепочки. Молодые клетки подвижны, имеют перитрихиально расположенные жгутики, плазма их гомогенна. При старении клетки плазма становится гранулированной, в ней накапливается гранулеза (вещество типа крахмала). В центре клетки или ближе к ее концу формируется спора, которая в поперечнике значительно шире, чем вегетативная клетка, и поэтому клетка в этот период приобретает форму веретена. Размер спор 1,3 х 1,6 мкм. На рисунке 178 изображены клетки Cl. pasteurianum со спорами. Морфология спор и поведение ядерного вещества в процессе спорообразования у клостридиев детально описаны на стр. 228 В. И. Дудой.
Рис. 178. Клетки Clostridium pasteurianum со спорами. Увел. X 3500 (по В.И. Дуде).
Азотфиксирующая функция выявлена у многих представителей рода Clostridium: Cl. pasteurianum, Cl. butyricum, Cl. butylicum, Cl. beijerinckia, Cl. pectinovorum, Cl. acetobutyli-cum и других видов. Наиболее энергичный азотонакопитель - Cl. pasteurianum - фиксирует 5-10 мг азота на 1 г потребленного источника углерода.
Наряду с молекулярным азотом бактерии рода Clostridium хорошо усваивают минеральные и органические азотсодержащие соединения. В качестве источника углеродного питания бактерии рода Clostridium используют различные соединения, которые обычно одновременно служат для них и источником энергии. К фосфору, калию и кальцию они значительно менее чувствительны, чем азотобактер. Однако удобрение почв фосфорно-калийными солями, известкование почв или компостов всегда приводит к возрастанию численности.
Клостридии относительно устойчивы к кислой и щелочной реакции среды. Область рН, при которой их развитие протекает нормально, довольно широка; минимальное значение рН ниже 4,5, максимальное - выше 8,5.
Влияние воздушно-водного режима на развитие бактерий рода Clostridium изучено достаточно полно. Будучи анаэробными, они хорошо переносят высокое насыщение почвы влагой. Однако оптимальная степень увлажнения для них определяется типом почвы и обеспеченностью органическим веществом. Лучше всего клостридий развивается при влажности почвы, равной 60-80% от полной вла-гоемкости.
Таблица 46. Бактериоз овса и суданской травы: 1 - бурый (красный) бактериоз овса; 2 - бактериоз суданской травы.
Больше всего бактерий рода Clostridium в верхних слоях почвы, которые богаты органическими веществами.
Бактерии рода Clostridium но-разному относятся к температуре, встречаются как мезофильные. так и термофильные бактерии. Молекулярный азот фиксируют лишь мезофилы.
У мезофильных форм оптимальная температура развития чаще всего находится в диапазоне 25-30 °С. Предел максимальных температур 37-45 °С.
Таблица 47. Болезни хлопчатника, табака и свеклы: 1 - гоммоз хлопчатника; 2 - бактериальная рябуха табака; 3 - серебристая болезнь свеклы (справа - пятна при увеличении).
Споры клостридиев весьма устойчивы к высоким температурам. Они выдерживают нагревание при 75 °С в течение 5 ч и в течение 1 ч нагревание при 80 °С. Споры термофильных клостридиев погибают при кипячении через 30 мцн. Более высокая температура (110 °С) быстро убивает их.
Со многими микроорганизмами в почве Clostridium находится в метабиотических отношениях, при которых предполагается обмен продуктами метаболизма. Так, азотобактер улучшает условия жизни клостридия, поглощая кислород, а клостридий вырабатывает из органических соединений, недоступных азотобактеру, органические кислоты, которые может ассимилировать азотобактер.
Было бы трудно ответить на вопрос: в каких почвах нет Clostridium? «Всеядность» Clostridium, малая взыскательность к условиям внешней среды, а также способность в неблагоприятных условиях переходить в состояние спор объясняют их широкое, практически повсеместное распространение.
Накопления азота в почвах за счет деятельности Clostridium, однако,невелики и не превышают, как правило, нескольких килограммов на один гектар почвы.
Корневые утолщения на корнях бобовых растений, содержащие азотфиксирующие симбиотические бактерии рода Rhizobium (см. бактерии клубеньковые). У тропических растений (Pavetta, Psychotria) обнаружены листовые К., содержащие азотфиксирующие бактерии … Словарь микробиологии
Клубеньковые бактерии бобовых - Данные палеонтологии свидетельствуют о том, что самыми древними бобовыми культурами, имевшими клубеньки, были некоторые растения, принадлежащие к группе Eucaesalpinioideae. У современных видов бобовых растений клубеньки обнаружены … Биологическая энциклопедия
АЗОТ-ФИКСИРУЮЩИЕ БАКТЕРИИ - АЗОТ ФИКСИРУЮЩИЕ БАКТЕРИИ, бактерии, могущие питаться свободным N атмосферы, совершенно непригодным для питания большинства микробов. Известны две группы А. б.: одни из них, т. н. «клубеньковые бактерии», фиксируют азот в симбиозе с… … Большая медицинская энциклопедия
Корень1 - О строении и функциях корня и о различных ого модификациях мы знаем гораздо меньше, чем о стебле и листе. Одной из причин этого являются определенные технические трудности, связанные с изучением подземных органов вообще. Однако за… … Биологическая энциклопедия
Корень - Первичный корень сохраняется у многих хвойных на всю жизнь и развивается в виде мощного стержневого корня, от которого отходят боковые. Реже, как у некоторых сосен, первичный корень недоразвивается и заменяется боковыми. Кроме длинных… … Биологическая энциклопедия
Кормовые травы - Так называются растения, разводимые на полях на корм скоту; такую культуру называют травосеянием. К. травы сеются, впрочем, не только на полях, но и на лугах и выгонах, но мы имеем в виду, главным образом, полевое травосеяние. Такая культура… … Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона
Ризосфера - Участок ризосферы. A амёба, поедающая бактерий; BL малоактивные бактерии; BU активные бактерии; RC получаемый корнем углерод; SR отшелушивающиеся корневые во … Википедия
Клевер - (Trifolium) род многолетних и однолетних травянистых растений семейства бобовых (Leguminosae). Стебли цилиндрической формы. Листья тройчатые, у некоторых видов пальчаторассечённые с 5 9 листочками. Цветки мелкие (красные, розовые, жёлтые … Большая советская энциклопедия
Семейство казуариновые (Casuarinaceae) - В семейство казуариновых входит более 60 видов странного облика деревьев (высотой более 30 м) и кустарников (от 30 50 см до 3 4 м) с тонкими, обычно ниспадающими, зелеными побегами, на первый взгляд безлистными. Все они объединяются в род … Биологическая энциклопедия
ЛОХОВЫЕ - порядок (Elaeagnales) и единств, семейство (Elaeagnaceae) двудольных растений. Кустарники, часто колючие, и небольшие деревья. Молодые побеги, листья и цветки густо покрыты щитовидными чешуйками или звездчатыми волосками. Листья цельные. Цветки б … Биологический энциклопедический словарь
Клубеньковые бактерии - Сечение клубенька корня сои. Бактерии, лат. Bradyrhizobium japonicum, обсеменяют корни и входят в азотфиксирующий симбиоз. Клубеньковые бактерии … Википедия
Азот - существеннейший фактор почвенного плодородия. Он входит в состав жизненно важных соединений - аминокислот, белков, нуклеиновых кислот.
Атмосфера Земли содержит колоссальное количество азота - 79,2 процента, однако он недоступен для растений. Для растений важен не атмосферный азот, а содержащийся в почве. Между тем запасы доступных для растений форм азота даже в черноземных почвах не так велики, чтобы бесперебойно обеспечивать высокие урожаи сельскохозяйственных культур.
В почве азот находится в связанном состоянии в основном в виде солей азотной кислоты (нитратов) и солей аммония. Еще в XVII веке немецкий химик Иоганн Глаубер (1604-1670) обратил внимание на исключительную важность этих соединений для роста растений. В своих сочинениях он назвал селитру солью плодородия. Началась интенсивная эксплуатация залежей чилийской селитры. Человечество освоило искусственную фиксацию атмосферного азота, создало мощную азотную индустрию.
Однако огромные масштабы промышленного производства связанного азота вселяют в нас не только уверенность в устойчивых высоких урожаях, но и обоснованную тревогу в связи с загрязненностью природной среды азотистыми соединениями. Чрезмерное внесение в почву азотных удобрений нарушает естественный круговорот веществ. К тому же растения усваивают только 40-50 процентов внесенного в почву азота, а остатки попадают в водоемы и грунтовые воды, вызывая их загрязнение. Нитраты и нитриты чрезвычайно опасны для здоровья людей.
В связи с остротой нитратной проблемы ученые еще настойчивее изучают процессы естественной фиксации атмосферного азота клубеньковыми бактериями, а также некоторыми свободноживущими микроорганизмами.
Именно благодаря этим микроорганизмам содержание азота в почвах в случае их рационального использования сохраняется или даже несколько увеличивается. На каждом гектаре почв, занятом бобовыми растениями, имеющими на корнях клубеньки, фиксируется от 100 до 250 килограммов атмосферного азота. Часть его используется самими бобовыми для синтеза азотсодержащих веществ (аминокислот, белков, нуклеиновых кислот.), а около 30 процентов остается с пожнивными остатками в почве, обеспечивая тем самым повышение ее плодородия.
Из всех живых организмов только бактерии нескольких родов способны к фиксации атмосферного азота. Наиболее известная из них - это симбиотическая бактерия Rhizobium, которая образует клубеньки на корнях бобовых и некоторых других растений.
В 1866 г. известный ботаник и почвовед М. С. Воронин увидел в клубеньках на корнях бобовых растений мельчайшие «тельца». Воронин выдвинул смелые для того времени предположения: он связал образование клубеньков с деятельностью бактерий, а усиленное деление клеток ткани корня с реакцией растения на проникшие в корень бактерии. Двадцать лет спустя голландский ученый Бейеринк выделил из клубеньков гороха, вики, чины, фасоли, сераделлы и лядвенца бактерии и изучал их свойства, проверив способность заражать растения и вызывать образование клубеньков.
Клубеньковые бактерии могут быть палочковидными и овальными. Из 13000 видов (550 родов) бобовых растений наличие клубеньков выявлено пока только приблизительно у 1300 видов (243 рода). Сюда в первую очередь относятся виды растений, использующиеся в сельском хозяйстве (более 200).
Клубеньковые бактерии снабжают бобовое растение азотом, который фиксируют из воздуха. Растения же, в свою очередь, поставляют бактериям продукты углеводного обмена и минеральные соли, необходимые им для роста и развития.
Таким образом, бобовые растения и клубеньковые бактерии находятся в состоянии симбиоза.
Клубеньковые бактерии микроаэрофилы (развиваются при незначительных количествах кислорода в среде), предпочитающие, однако, аэробные условия (аэробы). Если говорить о клубеньковых бактериях вообще, то для них образование клубеньков только у группы бобовых растений уже само по себе специфично - они обладают избирательностью к бобовым растениям. Среди них есть такие, которые способны заражать лишь определенную, иногда большую, иногда меньшую, группу бобовых растений.
Специфичность клубеньковых бактерий может быть узкой (клубеньковые бактерии клевера заражают только группу клеверов). При широкой специфичности клубеньковые бактерии гороха могут заражать растения гороха, чины, бобов, а клубеньковые бактерии чины и бобов могут заражать растения гороха, т. е. все они характеризуются способностью «перекрестного заражения».
В связи с вышеизложенным, нам показалось интересным проследить процесс образования симбиотических клубеньков на корнях гороха Pisum sativum.
Цели и задачи исследования:
1. Изучить литературу по теме исследования.
2. Разработать методику проведения эксперимента.
3. Выяснить, на каком этапе развития растения гороха Pisum sativum на его корнях появляются видимые симбиотические клубеньки.
4. Сделать наглядные пособия для уроков биологии.
Новизна работы в том, что нами была придумана и опробована методика наблюдений за образованием клубеньков на корнях гороха. Прикладное значение работы в том, что приготовленные препараты корней гороха с клубеньками используются как демонстративный материал на уроках ботаники.
Основная часть
2. 1. Методика проведения эксперимента
В качестве объекта исследования выбрано растение гороха Pisum sativum сортов «Орегон» и «Альпийский изумруд».
Жизненная форма гороха – однолетняя трава, что позволяет за сравнительно короткий срок (2 месяца) получить результаты эксперимента.
Для исключения влияния неблагоприятных условий, главным образом погодных, в период вегетации растения, семена желательно сеять в закрытом грунте (в теплице, на подоконнике или лоджии). Можно использовать один большой или несколько маленьких контейнеров, заполненных одинаковой земляной смесью.
В качестве субстрата для выращивания растений можно взять обычную почву с садового участка, либо готовый грунт из садового центра.
Семена перед посевом замочить в воде. Проклюнувшиеся семена посадить в грунт, полить. Через каждые 2 дня после появления проростков извлекать по одному растению, освобождать корни от частиц почвы, промывая водой.
Необходимо внимательно осматривать корни растений и фиксировать все изменения, происходящие в процессе выращивания гороха.
2. 2. Ход эксперимента. Результаты и обсуждения
Этап № 1. Подготовка семян к посеву.
1 июля я взяла семена гороха сорта «Орегон» и положила их под марлю. Я залила их водой так, чтобы вода почти полностью покрыла семена, но в то же время они могли дышать. Они были зеленого цвета.
В магазинах города продается не только сорт «Орегон». Я также купила и «Альпийский изумруд», который, для сравнения, положила в другое блюдце. Хоть и называется этот сорт «Альпийский изумруд», цвет его семян желтый. Вероятно, название он получил из-за изумрудного цвета семян, находящихся в состоянии молочной спелости. Семена крупнее семян сорта «Орегон».
В одном пакетике примерно по 15 семян. Всего пакетиков я взяла четыре штуки, каждого вида по два пакетика. Так много семян потребовалось на случай того, что не все семена прорастут.
Сухие семена жесткие и сморщенные. К вечеру семена гороха набухли, стали мягкими, то есть из состояния покоя они перешли в стадию набухания.
Этап № 2. Наблюдение за прорастанием семян.
6 июля, через 5 суток после начала эксперимента, семена стали крупнее, семенная кожура стала гладкой. Воду я меняла чаще, чтобы выделялись вещества – тормозители прорастания. Проростков еще не видно. В цвете семян преобладает зеленый пигмент. На улице было жарко, t=27oC и на подоконнике температура воздуха была высокая, что способствовало прорастанию семян. Ведь, как известно, для прорастания семян необходимы вода, воздух и оптимальная температура.
7 июля семена сорта «Орегон» стали в два раза крупнее. Семена сорта «Альпийский изумруд» постепенно становятся ярче и крупнее. Их размер в полтора раза больше, чем накануне.
По литературным данным время от посева до появления ростков может достигать трех недель.
На поверхности семян появились светлые вздутия – начало фазы наклевывания, но они появились не у всех семян.
У сорта «Орегон» они образовались у половины семян (50% всхожести).
У сорта «Альпийский изумруд» светлые вздутия больше по размеру, но у меньшего количества семян (30% всхожести).
Воду семена поглощают хорошо. Если на ночь поменять воду, утром следующего нужно было добавлять снова, несмотря на прохладную температуру ночью около 18 oC.
Фаза наклевывания произошла раньше, чем описывалось в прочитанной мной литературе – через неделю после намачивания семян.
8 июля у семян появились корешки, они белые, светлые. У сорта «Альпийский изумруд» они крупнее, чем у сорта «Орегон». Это объясняется тем, что семена «Альпийского изумруда» крупнее, следовательно содержат больше запасных питательных веществ.
Этап № 3. Посадка семян гороха в почву.
10 июля. Сегодня я посадила семена гороха в почву «Terra Vita». Фаза наклевывания наступила у обоих сортов на 10-е сутки.
Всего я посадила 17 семян, из которых 5 сорта «Альпийский изумруд» и 12 сорта «Орегон».
Сначала я в каждый горшок насыпала почву (потребовалось 2 пакета земли), сделала ямку в каждом горшке и положила в каждую ямку по семени вниз корешком.
Засыпала семя почвой и побрызгала водой, чтобы увлажнить ее.
Длина корешков проростков составила примерно 4мм. Нужно сажать их осторожно, чтобы они не сломались.
Через 5 дней из почвы появились проростки.
Максимальная высота растений – 2,5 см.
Минимальная высота растений – 0,5 см.
Оба сорта развиваются примерно одинакого, но все же заметно опережение в развитии у сорта «Альпийский изумруд».
Через 2 недели после посева высота растений доходит до 10 см. Появились первые настоящие листья с усиками.
Стержневая корневая система растения имеет много боковых корней. На этой стадии нет видимых изменений корневой системы, связанных с проникновением бактерий.
Согласно литературным данным бактерии рода Risobium начинают проникать в корни бобовых уже на стадии проростка.
О механизме проникновения клубеньковых бактерий в корень растения существует ряд гипотез.
Интересна и не лишена оснований гипотеза о проникновении клубеньковых бактерий в ткань корня через корневые волоски, её признает большинство исследователей.
Не исключено, что клубеньковые бактерии могут проникать в корень через эпидермальные клетки молодых верхушек корня. По мнению
Пражмовского (1889), бактерии могут проникать в корень только через молодую клеточную оболочку (корневых волосков или эпидермальных клеток) и совершенно не способны преодолевать химически измененный или опробковевший слой коры. Этим можно объяснить, что клубеньки обычно развиваются на молодых участках главного корня и появляющихся боковых корнях.
Известно, что клубеньковые бактерии вызывают размягчение стенок корневых волосков. Однако ни целлюлазы, ни пектинолитических ферментов они не образуют. В связи с этим было высказано предположение, что клубеньковые бактерии проникают в корень благодаря выделению ими слизи полисахаридной природы, вызывающей синтез растениями фермента полигалактуроназы. Этот фермент, разрушая пектиновые вещества, влияет на оболочку корневых волосков, делая её более пластичной и проницаемой.
Процесс внедрения клубеньковых бактерий в ткань корня одинаков у всех видов бобовых растений и состоит из двух фаз. В первую фазу происходит инфицирование корневых волосков. Во вторую фазу интенсивно идет процесс образования клубеньков. Продолжительность фаз различна у разных видов растений: у Trifolium fragiferum первая фаза продолжается 6 дней, у Trifolium nigrescens – 3 дня. В некоторых случаях очень трудно обнаружить границы между фазами. Наиболее интенсивное внедрение клубеньковых бактерий в корневые волоски происходит на ранних этапах развития растения. Вторая фаза заканчивается в период массового образования клубеньков.
Для того чтобы не пропустить начала второй фазы – образования видимых клубеньков, нам необходимо было каждые два дня извлекать из почвы по одному растению, внимательно рассматривать корни и фиксировать изменения. На фото №2 – появление проростка и фото №3 – образование первых настоящих листьев. В этот период не было обнаружено клубеньков. На фото №4 длина стебля 15 см, длина корней 15 см. Видимых изменений на корнях не обнаружено. На фото №5 длина корня не изменилась, но появились новые боковые корни. Длина стебля более 20 см, появился первый цветок.
На фото №6 длина корня 25 см. На боковых корнях после промывания их водой хорошо видны вздутия – клубеньки.
Проникнув в корень (через корневой волосок, эпидермальную клетку, места повреждений корня), клубеньковые бактерии далее перемещаются в ткани корня растения. Наиболее легко бактерии проходят через межклеточные пространства.
Однако в большинстве случаев внедрившаяся клетка, активно размножаясь, образует так называемые инфекционные нити (или инфекционные тяжи) и уже в виде таких нитей перемещается в ткани растения.
По существу инфекционная нить – это колония размножившихся бактерий. У однолетних растений инфекционные нити возникают обычно в первый период инфицирования корня, у многолетних – в течение длительного периода развития.
Бактерии могут высвобождаться из инфекционной нити в разное время и разными способами.
Сосудистая система клубенька обеспечивает связь между бактериями и растением – хозяином. По сосудистым пучкам транспортируется питательные вещества и продукты обмена.
Клубеньковые бактерии, вышедшие из инфекционной нити, продолжают размножаться в ткани хозяина. Основная масса бактерий размножается в цитоплазме клетки, а не в инфекционной нити. Зараженные клетки дают начало будущей бактероидной ткани.
Наполняющиеся быстро размножающимися клетками клубеньковых бактерий растительные клетки начинают усиленно делиться. После того как растительные клетки полностью заполнятся бактериями, митоз прекращается. Однако клетки продолжают увеличиваться в размере и часто сильно вытягиваются, что приводит к образованию опухолеподобных клубеньков. Бактероидная зона клубенька занимает его центральную часть и составляет от 16 до 50 % от общей сухой массы клубеньков.
При выращивании гороха необходимо было создавать условия, без которых невозможно образование ими клубеньков. Одним из важнейших является достаточный полив.
Для развития клубеньков оптимальная влажность 60 – 70% от полной влагоемкости почвы. Минимальная влажность почвы, при которой еще возможно развитие клубеньковых бактерий в почве, приблизительно равна 16% от полной влагоемкости. При влажности ниже этого придела клубеньковые бактерии обычно уже не размножаются, но тем не менее они не погибают и могут длительное время сохраняться в неактивном состоянии. Недостаток влаги приводит и к отмиранию уже сформировавшихся клубеньков.
Так как почвенный субстрат “Terra Vita” не обладает достаточной влагоемкостью, поливать приходилось часто по мере высыхания почвы.
Избыточная влажность, как и ее недостаток, также не благоприятна для симбиоза – из-за снижения степени аэрации в зоне корней ухудшается снабжение корневой системы растения кислородом. Недостаточная аэрация отрицательно влияет и на живущие в почве клубеньковые бактерии, которые, как известно, лучше размножаются при доступе кислорода.
С помощью лакмусовой бумаги нами проверялась почва, в которой выращивался горох, так как в кислых почвах, как отмечает А. В. Петербургский, в почвенных раствор переходят соли алюминия и марганца, не благоприятно действующие на развитие корневой системы растений и процесс азотоусвоения, а также снижается содержание усвояемых форм фосфора, кальция, молибдена и углекислоты.
Важную роль во взаимоотношениях клубеньковых бактерий и бобовых растений играет температурный фактор. Максимальная азотфикация ряда бобовых растений наблюдается при 20-25оС. Температура выше 30оС отрицательно влияет на клубеньковые бактерии.
Соблюсти это условие позволило выращивание растения гороха на подоконнике, где нет резких колебаний температуры воздуха и почвы.
Следовательно, образование клубеньков – результат сложных явлений, начинающихся вне корня. Вслед за начальными фазами инфекции индуцируется образование клубенька, затем происходит распространение бактерий в зоне клубеньковой ткани и фиксация азота.
Сроки появления первых видимых клубеньков на корнях различных видов бобовых растений различны (М. В. Федоров,1952). Появление их у большинства бобовых культур чаще всего происходит во время развития первых настоящих листьев. Так, образование первых клубеньков люцерны посевной наблюдается между 4-м и 5-м днями после прорастания, а на 7-8 день этот процесс происходит у всех растений. Клубеньки у люцерны серповидной появляются через 10 дней.
Появление клубеньков у гороха Pisum Sativum произошло на 22 день после посева семян. Существенных различий в сроках появления клубеньков у сортов «Альпийский изумруд» и «Орегон» нами не обнаружено.
Клубеньки на корнях гороха имеют беловатую окраску, плотные на ощупь. В последствии окраска клубенька стала розоватой. Розовая окраска определяется наличием в клубеньках пигмента, по химическому составу близкого гемоглобину крови. В связи с этим пигмент называется леггемоглобином (легоглобином) – гемоглобином Leguminosae.
К моменту образования плодов (бобов) начался некроз клубеньков, они потемнели и стали более мягкими на ощупь. По литературным данным некроз у однолетних бобовых начинается в период массового цветения растения – хозяина. В нашем случае более позднее отмирание клубеньков связано с тем, что мы отмечали лишь видимые, заметные глазу процессы, когда они распространились уже из центра клубенька к его периферии. Старые клубеньки темные, дряблые, мягкие. При надрезе из них выступает водянистая слизь. Ученые считают, что процессу разрушения клубенька, начинающегося с опробковения клеток сосудистой системы, способствует понижение фотосинтетической активности растения, сухость, либо чрезмерная влажность среды (почвы и воздуха).
Заключение и выводы.
Проблема сохранения почвенного плодородия одна из важнейших, ведь от нее напрямую зависит обеспечение людей пищей.
Попытки решить ее путем внесения химических удобрений имеет и негативные последствия. Неудивительно, что в странах с высокоразвитым земледелием обычно до 20-25% окультуренной площади занято бобовыми растениями. При этом одновременно можно получить и ценный корм – зеленую массу растений и обогащение почвы азотом.
К сожалению, садоводы-любители в своей практике не используют такой простой и, что более важно, экологически чистый артотехнический прием, как посев сидератов – зеленых удобрений. Часто можно видеть, как сжигают или выносят за пределы участка растительные остатки. А ведь за период вегетации растения забирают из почвы азот для построения своего тела. Теряет почва азот и в результате уборки урожая. И вместо того, чтобы посадить горох, фасоль, клевер, люцерну, люпин, робинию, дачники вносят в обедненные почвы азотные удобрения, засоряя почву нитратами. Актуально, будто сегодня, а не в ХIХ веке написаны великим русским писателем-сатириком М. Е. Салтыковым-Щедриным строки: «Нынче химики да физики в ходу Такое уже нынче время настало, что в церкву не ходят, а больше, с позволения сказать, в удобрения веруют».
Поэтому важен еще и просветительский аспект работы, связанный с необходимостью выращивания растений семейства Бобовых.
1. Симбиотические клубеньки образовались на корнях у всех посаженных растений гороха Pisum sativum.
2. Видимые клубеньки на корнях гороха появляются через 22 дня после посева семян.
3. Заметных отличий в образовании клубеньков у сортов «Орегон» и «Альпийский изумруд» не выявлено.